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SSOP基因分型对HLA—AB血清学纯合型结果的校证
本，进一步应用PCR—SSOP技术进行基因分型结果验证，分别有3例、8例为杂合型。HLA—A位点血清学错误率为7．1％(3／42)，B位点血清学错误率为17．8％(5／45)。两种分型方法不一致结果见附表。附表11例HIJA—A或B血清学纯合型与PCR—SSOP分型不一致结果3讨论目前，HLA—A、B位点的分型常采用血清学分型方法，由于其分型抗体多采用人源性抗血清或单克隆抗体，加之I类抗原结构复杂，新的等位基因不断发现,[link widoczny dla zalogowanych]，缺乏相应特异性抗血清来识别，以及HLA抗原之间存在较多的交叉反应，从而导致分型结果错误或漏检。Bozon等研究认为HLA—A、B血清学分型错误率分别为10％和20％，也有文献报道高达34％～35％。本研究对血清学分型为纯合型的42例HLA—A、45例HLA—B标本，进一步应用PCR—SSOP技术进行基因分型结果验证，分别有3例、8例为杂合型。HLA—A位点血清学错误率为7．1％医药论坛杂志2004年4月第2鲞星Z(3／42)，B位点血清学错误率为17．8％(5／45)，与文献报道基本一致。分析血清学漏检原因：①与患者疾病状态、标本来源及质量有关,[link widoczny dla zalogowanych]，其中2例为肾功能不全实施长期血液透析的患者；4例为恶性血液病患者，在配型前接受了不同程度的放疗、化疗，使细胞表面的HLA呈弱表达或不表达，导致血清学分型单倍体数增多，造成假性纯合子,[link widoczny dla zalogowanych]。1例为脐血标本，由于胎儿细胞表达HLA抗原未完全成熟，以致抗原反应较弱而漏检。1例因细胞数量较少、1例因细胞活性过低而漏检。②同一交叉反应组内的抗原因具有高度同源性，使血清学分型出现较强的交叉反应，导致交叉反应组间的抗原分辨困难而漏检，如A23和A24，A30和A31，B7和B13，B61和B54，B62和B75等都具有交叉反应。③某些低频抗原因缺乏高特异性抗体而漏检。如A68、B78等。而PCR—SSOP基因分型直接检测HLA基因序列，其特异性强，灵敏度高，结果准确可靠,[link widoczny dla zalogowanych]，且不受上述因素影响。随着分子生物学分型技术的不断发展,[link widoczny dla zalogowanych]，以DNA为基础的PCR—SSOP基因分型，已被公认为是一种稳定、可靠的HLA分型方法。吴书一等¨对47例HLA—A、B进行PCR—SSOP与PCR—SSP分型，两种方法结果相符，与国外Bozon等研究观点一致。因此，在异基因造血干细胞移植和实体移植领域，应用PCR—SSOP基因分型技术对供、受体的HLA血清学纯合型标本进行复核，可校正血清学分型错误，是提高移植配型准确率的重要方法。
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