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筑巢式PCR检测慢性粒细胞白血病bcr—abl mRNA
A．基因扩增片段为90bp．4例同时表达+qlmRNA、其中3例为急变期患。结果显示在CML患者存在：3种彤式的基变结果5付图,[link widoczny dla zalogowanych]。附图(MI。者存在3伸丹；式的基闪改变I、’’I‘川．’2'jllI1山巾’1憋。忠：：{ZjI．Z：力CMI．忠：‘01’}i{ll921；：{也{''1／911bp：l21)tff珥J竹～”。J．-I一．+--川h：IL：物3讨论I’／一}’l融合基凼是慢性粒细胞白血病最重要的分f怀志筑单式}CR是一种高度敏感和特异的基因分忻方、在慢垃柄人bcl。／ablmRNA检测中具有很高的flI，川f卣】部维扬等0报道．I立用nestedPCR可在10～101＼常细胞中检出1个携带hcl。／ablmRNA的白缸细咆．即敏感性为1／1O,[link widoczny dla zalogowanych]。～10．ntstt、dPCR斟为采用两次扩增．因此有很高的灵敏度．也增加丁特异性．也正因为如此，应严恪规范操作．并每次捡I伺0均斋设立阴性和阳性对照．以免造成误葶在本实验中我们采用nestedPCR检删T32例慢粒病人+结果30例阳性。bcl’／ablmRNA有两种类型．对于不同时期与帧岳的关系．目前尚有争议。MartiatSnMm’gan等认为表达bcl’exon3／ablexon2mRNAR患苦慢性期较容易进入加速或急变期．但Inoue(nOplka等认为‘引表达bcrexon3／ablexon2mRNA的患苦对干扰素治疗效果较好,[link widoczny dla zalogowanych]，慢性期持续时间长另外我们在30例病人中发现有4例表达2种类型的融合基因其中3例已处于急变期．提示bcr／abl融合基田的变|匕是慢粒急变的分子基础。近十几年来．由于新的化疗药物的问世和『匕疗方案的改进，白血病的生存期及预后有了明显的々观，如何检删白血病病人缓解唇的微小残留白血精细咆是延长患耆生存期的关键之一,[link widoczny dla zalogowanych]。RT／PCR检删方j圭勾我们提供丁一种有效的检测微量残留病的{支水．多研究发现痫情得到控制的慢性期CML~n干扰素冶的ML人．极大部分仍可检删到bcl。／ablmRNA．提示这部分病人尚未得到根治。因此,[link widoczny dla zalogowanych]，RT／PCR也是我们观察治开效果的手段。l致谢：感谢苏州医学院、江苏右血液研究所进行了部分病例染色体检查，感潮镇江医学院附属医院血液科提供了部分病例标衣)
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