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具有蛋白酶及解旋酶活性的HCV-NS3重组蛋白的纯化及活性分析
NS3丝氯酸蛋白酶)的裂解，：生至少l0种问的成熟蛋白研究证明,[link widoczny dla zalogowanych]，HCVNS3蛋白包括631个氨基酸．其N端为丝氯酸蛋白酶，C端划表现为NTP／RNA328中国病毒学第l9卷解旋酶活性L4】。体外实验和哺乳动物细胞的瞬时转染实验都证实,[link widoczny dla zalogowanych]，NS3编码的丝氨酸蛋白酶负责HCV基因组表达的前体蛋白的非结构区的切割加工(包括NS3，NS4A，NS4B，NS5A和NS5B)。由于释放这些非结构成熟蛋白是HCV复制、包装的必要前提条件，因此NS3丝氨酸蛋白酶在HCV的生命周期中具有极其重要的作用，并且成为抗病毒治疗的重要目标。研制直接靶向于HCV病毒的小分子抑制剂已经成为HCV抗病毒研究的热点,[link widoczny dla zalogowanych]。深入研究HCVNS3丝氨酸蛋白酶及一RNA解旋酶【5．6】的功能及酶学动力学性质对于开发HCV复制的抑制剂具有重要意义。然而，由于目前缺乏经济适用的HCV动物模型,[link widoczny dla zalogowanych]，制备具有丝氨酸蛋白酶和RNA解旋酶活性的NS3重组蛋白对于HCV抗病度药物的开发具有重要价值。我们利用酵母系统表达并纯化了NS3蛋白。重组蛋白的蛋白酶活性和解旋酶活性实验结果表明,[link widoczny dla zalogowanych]，获得的重组蛋白具有丝氨酸蛋白酶和RNA解旋酶活性。本研究为深入探讨NS3编码酶的生物功能、酶学动力学性质和开发抗病毒药物创造了条件。
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