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丙酮固定苯甲酸置换石蜡组织块制备技术及初步应用
术介绍·门丙酮固定苯甲酸置换石蜡组织块制备技术及初步应用张镰椿孙宏晨欧阳喈Rsf_王为丁完整保存组织结构和细胞形卷，尽可能地反映有美细胞遗传特征，Sato等川报道丁一种新的组织石蜡包埋方法，即丙酮固定，苯甲酸脱水石蜡包埋技术。我们经过实践应用．体会到该方法较福尔马林固定,[link widoczny dla zalogowanych]，酒精脱水石蜡包埋有明显的优点，现简介如下。1．标本与试剂：选用新鲜挺腺肿瘤标本8倒，取0．3crux1．Ocm×1．Ocm的组织块各二块，并平分成二组．一组l0{爵尔马林固定，常规石蜡包埋切片。一组用丙酮固定苯甲酸置换．石蜡包埋切片。固定至透明试剂①丙酮(4℃)，@苯甲酸丙酮饱和{瘦，@二甲苯．2．操作方法与步骤：①一组织块先以预玲之4℃丙酮固定,[link widoczny dla zalogowanych]，置于--20℃冰箱内一夜(可固定一周，其染色效果不受影响)．@将固定{瘦弃去，组织置于4"C丙酮，室温下授透1Stain，@弃击上述丙酮，咎人于室温丙酮15mln浸透．④移人苯甲酸I15min．⑤移人苯甲酸I中15rain，将丙酮置换(此时组织块呈黄白色),[link widoczny dla zalogowanych]。@最后移人二甲苯二次名15min透明，⑦通用硬蜡(56C～58℃)授蜡三次．每次各1．2h。@包埋．@切片4m厚，常规进行HE染色和免疫组化染色。@将另一组组织块经1o梧尔马椿固定，酒精脱水．二甲苯透明．常规授蜡包埋切片等常规处理作为对照组。圈l基底细胞穰瘟HE3．结果和讨论挺腺肿瘤组织经丙酮固定、脱水、苯甲酸置换、石蜡包埋、HE染色，其细胞形态和组织结构保存良好(图1)，细胞膜显示较l0福尔马林固定、酒精脱水、二甲苯透明好，只是进行苏术紊染棱时问珞长。免疫组化染色结果，Amex包埋组织见纤维凝集索清楚地位于腺淋巴瘤上皮基底膜医和散在于淋巴基质内(图2)．常规石蜡包埋的组织显示出上述结果，但其背景探，反差小．可见Amex包埋优于常规石蜡包埋。土井田成等在10福尔马林固定的腺淋巴癌中尚未见到纤维凝集索阳性反应．圈z晾淋巴癌纤维凝集素ABC通过本实验，可得出结论是：丙酮固定．脱水．苯甲酸置换石蜡包埋组可较清楚地显示细胞形态和组织结构．在某些抗体免疫组化染色上明显优于常规石蜡包埋组织．Sato等报道应用此技术可检测出常规石蜡切片检测困难的淋巴细胞表面抗骧0)。此外Amex石蜡包埋切片上．容易提取DNA、RNA和蛋白质,[link widoczny dla zalogowanych]。)。因此，在分子生物学亦具有广泛之直用前景,[link widoczny dla zalogowanych]。另外本文作者对Amex包埋方法有所改变，即，将原法在真空条件下浸蜡4h改为普通条件下进行授蜡．其结果厨样获得满意效皋．
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